檢測(cè)是非瘟防控中最重要的一環(huán),但是采樣的科學(xué)性、規(guī)范性不僅僅影響檢測(cè)的結(jié)果,還可能影響到豬場的安危。
在非瘟防控過程中,唾液檢測(cè)是防控非瘟的重要手段。
在自然感染狀態(tài)下,非洲豬瘟病毒優(yōu)先出現(xiàn)在唾液樣本中,甚至從感染的當(dāng)天就能從唾液/扁桃體當(dāng)中開始出現(xiàn)病毒;而從感染到出現(xiàn)病毒血癥需要較長的時(shí)間,有資料顯示需要13-19天,甚至更長。若是以血液檢測(cè)為防控非瘟的檢測(cè)手段,已經(jīng)貽誤了時(shí)機(jī),造成環(huán)境污染嚴(yán)重,定點(diǎn)清除已很難達(dá)到效果。
豬場要想對(duì)該病進(jìn)行預(yù)防檢測(cè),最好進(jìn)行唾液檢測(cè)。血液檢測(cè)用于疾病的確診,若從血液檢測(cè)到病毒,其污染面已經(jīng)非常廣了。
為什么要使用唾液檢測(cè)?
	
血檢法VS唾液學(xué)檢法
	
1、采血檢測(cè)方法需要人員進(jìn)到豬場去抓豬,如果豬只攜帶病毒,人在采血過程中就起到了媒介作用,再去抓下一只豬時(shí)會(huì)將病毒進(jìn)行二次傳播,從而導(dǎo)致大面積的病毒污染。唾液檢測(cè)法可避免。
2、口腔中病毒比血液中病毒種類更多,出現(xiàn)更早,唾液檢測(cè)的檢出率更高,漏檢率更低。
3、采血會(huì)使豬產(chǎn)生恐懼應(yīng)激,而唾液檢測(cè)不存在這一方面問題,并且符合動(dòng)物福利標(biāo)準(zhǔn)。
4、血檢法具有滯后性,在早期控制傳播和挽救損失方面效果欠佳。
目前大家已經(jīng)公認(rèn)的是,非洲豬瘟病毒的傳播途徑主要是唾液、血液、糞便3個(gè)方面,這也是非瘟爆發(fā)存在有三個(gè)階段,分別為早、中、晚期。其中泔水傳播被視為是早期階段,因此非瘟病毒最先出現(xiàn)在唾液樣本中。非瘟病毒從口腔進(jìn)入,在口腔里繁殖造成局部感染,如果此時(shí)豬的抵抗力夠強(qiáng),就能在口腔中殺滅病毒,或者把病毒控制在局部感染,帶毒但是不發(fā)病,這是早期階段。
當(dāng)病毒通過扁桃體進(jìn)入血液形成了全身感染,動(dòng)物會(huì)出現(xiàn)厭食、嘔吐、出血、死亡等癥狀。對(duì)于想排查凈化的豬場來說,當(dāng)病毒存在于血液中時(shí)就已經(jīng)處于晚期階段了,此時(shí)進(jìn)行采血檢驗(yàn)就存在明顯的滯后性!
相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),唾液中同樣存在血液中含有的各種蛋白質(zhì)成分、DNA、 RNA、脂肪酸以及各種微生物等,因此,通過唾液的檢測(cè)來進(jìn)行疾病的診斷是科學(xué)可行的。非瘟病毒的唾液檢測(cè)原理就是如此,所以,唾液樣的檢測(cè)為優(yōu)先必要措施,若貽誤時(shí)機(jī)則形成病毒血癥,環(huán)境污染嚴(yán)重,定點(diǎn)清除效果也將大打折扣。
唾液樣本采集時(shí)需要注意如下幾個(gè)問題:
1、為了保證樣品具有足夠高的病毒濃度,采樣前必須停水停料至少2個(gè)小時(shí),并且保證豬已經(jīng)將唾液采集袋/繩完全咬透,否則實(shí)驗(yàn)室無法分離出唾液時(shí)只能加水稀釋,病毒量過低的樣本就會(huì)因?yàn)檫@個(gè)原因檢測(cè)不到,出現(xiàn)假陰性的情況。
2、采樣時(shí)一般是把唾液采集袋/繩固定在欄桿上,回收唾液采集袋/繩的時(shí)候,操作者一定要帶上一次性手套;收集1份,更換1次手套,防止樣本交叉污染。
3、無唾液采集袋/繩時(shí),可用醫(yī)用紗布+醫(yī)用棉繩自行制作唾液采集袋;不可使用其他的可能含有熒光劑的布料、繩索,防止添加了熒光劑的布料和繩索干擾PCR的熒光采集,出現(xiàn)假陽性。
	
	
唾液采集袋
4、鼻拭子、咽拭子的采樣操作者需要佩戴乳膠手套后再佩戴一次性PE手套,選用長度大于20cm的長棉簽,采鼻腔液時(shí)建議兩根干燥棉簽同時(shí)采,棉簽深入鼻腔或口腔,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng),徹底潤濕后取出。采集后的棉簽放入封口袋中。采集下一頭時(shí)需更換PE手套。采集后的樣本放入冰盒中,低溫保存,盡快運(yùn)輸檢測(cè)。
	