豬藍(lán)耳病具有極強(qiáng)的傳染性和危害性。藍(lán)耳病病毒變異快、傳播途徑多樣，易在豬群中持續(xù)存在與擴(kuò)散，導(dǎo)致母豬繁殖障礙，引發(fā)流產(chǎn)、死胎等問(wèn)題，顯著降低產(chǎn)仔數(shù)及仔豬成活率。同時(shí)，藍(lán)耳病常引起仔豬呼吸道疾病頻發(fā)和生長(zhǎng)遲緩，大幅增加養(yǎng)殖成本。若豬場(chǎng)藍(lán)耳病不穩(wěn)定、反復(fù)發(fā)生，不僅會(huì)嚴(yán)重影響豬群健康，還會(huì)打亂正常生產(chǎn)計(jì)劃，降低整體生產(chǎn)效率。
維持藍(lán)耳病穩(wěn)定對(duì)減少豬場(chǎng)效益損失至關(guān)重要。8月15日，碩騰特邀中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)周磊教授、碩騰中國(guó)高級(jí)技術(shù)服務(wù)經(jīng)理楊麗梅老師，在線分享豬場(chǎng)藍(lán)耳病維穩(wěn)挑戰(zhàn)與降損策略以及碩騰豬技術(shù)團(tuán)隊(duì)多年實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)總結(jié)的“藍(lán)耳病三色防控體系”，幫助豬場(chǎng)朋友實(shí)現(xiàn)藍(lán)耳病的防控技術(shù)落地。
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豬藍(lán)耳病病毒新毒株對(duì)養(yǎng)殖各個(gè)環(huán)節(jié)的損害程度如何？
周磊：豬藍(lán)耳病在不同情況下，尤其在不穩(wěn)定狀態(tài)下，會(huì)造成豬場(chǎng)嚴(yán)重?fù)p失。以某2400頭母豬場(chǎng)為例，藍(lán)耳病不穩(wěn)定時(shí)首先表現(xiàn)為典型的繁殖障礙：母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎增多，多為中后期懷孕母豬，常伴有發(fā)燒、減料；母豬產(chǎn)后乳汁分泌受嚴(yán)重影響，奶水差的比例上升；基礎(chǔ)群豬只明顯感染、出現(xiàn)抵抗力及免疫力下降的亞健康狀況，如皮炎、淚斑、呼吸道癥狀或其他肢蹄問(wèn)題。新生仔豬活力弱，弱仔比例增加，部分不剖檢即可見腹股溝淋巴結(jié)腫大及明顯繼發(fā)感染，還可能出現(xiàn)非病毒性（如非PED或德爾塔病毒感染所致）的腹瀉，僵弱比例較高。保育豬生長(zhǎng)受阻，伴有關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)癥狀（多為鏈球菌感染），以及咳嗽、腹式呼吸、腹瀉、背毛粗亂等，整體豬群表現(xiàn)不穩(wěn)定。
從生產(chǎn)數(shù)據(jù)看，后備豬利用率可降至50%，流產(chǎn)窩數(shù)在疫情波動(dòng)后可達(dá)23窩/月，返情和空懷比例上升，年分娩率降至81%以下；產(chǎn)仔數(shù)下降2-3頭甚至更多；產(chǎn)房死淘率超5%，保育死淘率平均達(dá)18%，高時(shí)超過(guò)30%。按前年豬價(jià)估算，此類生產(chǎn)損失直接經(jīng)濟(jì)影響約600萬(wàn)元，若計(jì)入配種節(jié)奏打亂、固定資產(chǎn)折舊、人工及治療成本增加，總損失可達(dá)1000萬(wàn)元左右。
即便在陽(yáng)性穩(wěn)定場(chǎng)，毒株變異或新毒株入侵（如類NADC34進(jìn)入類NDC30馴化場(chǎng)）仍可導(dǎo)致巨大損失。例如山東某大型場(chǎng)原流產(chǎn)僅數(shù)頭至數(shù)十頭，新毒株入侵后三個(gè)月內(nèi)流產(chǎn)近千窩，70日齡內(nèi)仔豬死淘率高達(dá)20%。由此可見，陽(yáng)性場(chǎng)一旦出現(xiàn)毒株重組或新毒株突破免疫屏障，其反復(fù)波動(dòng)造成的累積損失同樣不可低估。
生產(chǎn)過(guò)程中哪些環(huán)節(jié)會(huì)導(dǎo)致藍(lán)耳病的不穩(wěn)定？
周磊：藍(lán)耳病不穩(wěn)定的原因主要涉及穩(wěn)定場(chǎng)與不穩(wěn)定狀態(tài)之間的循環(huán)關(guān)系。豬群中藍(lán)耳病的循環(huán)狀態(tài)可分為兩種：第一種是理想的陰性群體，即母豬和仔豬均為雙陰狀態(tài)。此時(shí)需引入核酸陰性的后備豬和公豬精液，通過(guò)嚴(yán)格的外防輸入、持續(xù)監(jiān)測(cè)和精準(zhǔn)剔除來(lái)維持陰性，這種狀態(tài)相對(duì)易于控制。第二種更常見的是陽(yáng)性穩(wěn)定群體，多見于生物安全條件有限、沒(méi)有條件實(shí)現(xiàn)雙陰的豬場(chǎng)。
從流行病學(xué)模型（SIR模型）來(lái)看，豬群可分為易感（S）、感染（I）和康復(fù)/免疫（R）三種狀態(tài)。穩(wěn)定狀態(tài)意味著易感動(dòng)物少，多數(shù)豬只通過(guò)感染康復(fù)或免疫接種獲得抵抗力，病毒無(wú)法持續(xù)傳播。而不穩(wěn)定往往源于易感動(dòng)物比例高，未免疫或未馴化，一旦暴露于病毒即發(fā)生感染和疫情暴發(fā)。因此，維持陽(yáng)性穩(wěn)定的關(guān)鍵在于管控后備豬——通過(guò)免疫或本場(chǎng)病毒馴化，使其在入群前具備抵抗力，從而維持SIR三角平衡。
具體實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定需從多方面入手。首要的是防止新病原傳入，強(qiáng)化生物安全。風(fēng)險(xiǎn)較高的外來(lái)輸入包括活豬，后備豬和精液的引入，需嚴(yán)格檢測(cè)、隔離與馴化；設(shè)施漏洞和場(chǎng)址周邊環(huán)境變化（如樹木砍伐、道路修建、附近出現(xiàn)散戶養(yǎng)殖）可能破壞外部屏障；病死豬處理車輛可能攜帶病毒，因其在組織、血液和糞便中存活時(shí)間較長(zhǎng)；活疫苗等生物制品若受到污染，也存在傳播風(fēng)險(xiǎn)。
后備豬引種是造成不穩(wěn)定的另一重要因素。其風(fēng)險(xiǎn)包括兩方面：一是引入帶毒豬，可能由于未檢出的帶毒后備豬將新毒株傳入本場(chǎng)，導(dǎo)致基礎(chǔ)群感染；多來(lái)源、高頻次引種時(shí)，不同毒株（如類NADC30和類NADC34）共存并重組，延長(zhǎng)排毒和循環(huán)時(shí)間；隔離馴化時(shí)間不足或監(jiān)測(cè)不到位，部分持續(xù)感染豬雖血檢陰性但淋巴結(jié)、扁桃體等組織仍攜帶病毒，應(yīng)激后重新活化排毒。二是引入易感豬，若馴化不充分或免疫不到位，即使抗體陽(yáng)性率較高，也并不代表群體免疫充足；在基礎(chǔ)群大量排毒的情況下，引入后備豬仍可能因病毒載量過(guò)高而感染，導(dǎo)致疫情波動(dòng)。
病毒進(jìn)入豬場(chǎng)后的場(chǎng)內(nèi)循環(huán)感染同樣引發(fā)不穩(wěn)定。單點(diǎn)式生產(chǎn)中，不同日齡豬只混群加劇交互感染：病毒可垂直傳播給仔豬，在保育舍擴(kuò)散，并通過(guò)人員、物資傳播回母豬群；未能全進(jìn)全出時(shí)，遺留病豬感染新進(jìn)仔豬，造成病毒載量放大和免疫崩潰。胎兒期感染和保育階段混群也易導(dǎo)致疫情暴發(fā)。若不加管控，病毒在場(chǎng)內(nèi)反復(fù)傳播、重組甚至毒力返強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)室證實(shí)，即使低致病性毒株經(jīng)多次傳代也可恢復(fù)強(qiáng)毒力，造成嚴(yán)重?fù)p失。
藍(lán)耳病病毒傳播能力極強(qiáng)，可通過(guò)空氣、呼吸道、傷口、精液、消化道及垂直途徑擴(kuò)散，也可經(jīng)靴子、針頭、車輛甚至蒼蠅機(jī)械攜帶。公豬精液長(zhǎng)期帶毒（疫苗毒可達(dá)40天，野毒可達(dá)90-100天）是重要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，必須確保公豬陰性。疫情暴發(fā)時(shí)常呈聚集性傳播，與欄位、水線、料線分布一致。處理流產(chǎn)組織、胎衣等若不當(dāng)（如直接沖洗形成氣溶膠），會(huì)導(dǎo)致全場(chǎng)擴(kuò)散，正確做法應(yīng)是先密閉收集，再局部消毒、清洗、二次消毒，以降低氣溶膠風(fēng)險(xiǎn)。
藍(lán)耳病病毒自身特性也是不穩(wěn)定的重要原因。作為RNA病毒，藍(lán)耳病病毒高度變異，導(dǎo)致毒株多樣性和致病性差異顯著。親緣相近的毒株可能因片段重組（如獲得高致病性非結(jié)構(gòu)蛋白）而毒力懸殊，且測(cè)序僅能識(shí)別類型而非實(shí)際毒力。變異還導(dǎo)致抗原表位改變，使疫苗交叉保護(hù)不足，難以產(chǎn)生清除性免疫。此外，基因1型（歐洲型）等毒株的流行增加了防控復(fù)雜性，因此需要采取綜合策略應(yīng)對(duì)這些挑戰(zhàn)。
NADC毒株流行率最高，未來(lái)幾年的流行毒株會(huì)不會(huì)變化？有些廠家有對(duì)應(yīng)的毒株疫苗了，效果可靠嗎？
周磊：目前國(guó)內(nèi)流行的許多藍(lán)耳病毒株源自美國(guó)，除經(jīng)典的高致病性毒株外，諸如NADC30和NADC34等也均由美國(guó)傳入。美國(guó)當(dāng)前仍以譜系1毒株流行為主，偶爾出現(xiàn)譜系3毒株。相比之下，國(guó)內(nèi)近年來(lái)經(jīng)歷了NADC30的廣泛流行，且自2017年起NADC34也開始出現(xiàn)。盡管早期預(yù)測(cè)NADC34可能逐步成為優(yōu)勢(shì)毒株，但近兩年的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)表明，NADC30的流行率仍顯著高于NADC34，尚未被完全替代。預(yù)計(jì)在未來(lái)一段時(shí)間內(nèi)，NADC30仍將是國(guó)內(nèi)主要流行毒株。
針對(duì)疫苗選擇，目前尚未有真正商品化的NADC30毒株疫苗上市。NADC30毒株本身具有高度變異性，常發(fā)生大片段缺失和重組?；A(chǔ)研究表明，該毒株在復(fù)制過(guò)程中易于發(fā)生基因片段替換或重組，導(dǎo)致遺傳結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定。
所以，如果要將 NADC30 毒株作為馴化毒株使用，千萬(wàn)不要長(zhǎng)期或多次免疫相關(guān)疫苗。這類疫苗未經(jīng)完全評(píng)估或官方認(rèn)定，長(zhǎng)期使用或像商品化疫苗那樣一年免疫三次是非常危險(xiǎn)的，已有很多失敗案例證明其存在返強(qiáng)風(fēng)險(xiǎn)，這一點(diǎn)需要特別注意。
公豬精液核酸檢測(cè)不到，抗體能檢測(cè)到，精液能用于配種嗎？會(huì)不會(huì)垂直傳播？
周磊：公豬精液中病原的檢測(cè)成功率受檢測(cè)水平、采樣方法及具體操作情況的影響。我們知道，相較于血清或口腔液等樣本，精液檢測(cè)的難度通常更大。這主要是由于精液中蛋白質(zhì)含量較高，且存在一定的濃度和成分差異，使得核酸提取更為復(fù)雜。因此，建議將精液視為一種組織樣本進(jìn)行處理?？赏ㄟ^(guò)添加裂解液或進(jìn)行一次凍融等前處理步驟，以提高核酸釋放量和檢測(cè)陽(yáng)性率。另一方面，應(yīng)優(yōu)先選擇質(zhì)量可靠、靈敏度高、覆蓋毒株范圍廣的檢測(cè)試劑盒，這些都是影響檢出效果的關(guān)鍵因素。
若經(jīng)過(guò)上述處理仍檢測(cè)不到病原，則需謹(jǐn)慎判斷到底是檢測(cè)靈敏度不足，還是樣本確為陰性。在實(shí)際操作中，理想的做法是將公豬站置于空氣過(guò)濾、生物安全級(jí)別高的陰性環(huán)境中運(yùn)行，或直接將工作站建于外部獨(dú)立區(qū)域，最大限度維持陰性狀態(tài)。若不具備自建陰性公豬站的條件，也可選擇采購(gòu)來(lái)源可靠、經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè)的陰性精液。如果不得不使用某頭公豬的精液，則需清醒認(rèn)識(shí)其中風(fēng)險(xiǎn)。即便公豬血液檢測(cè)未顯示病毒血癥、精液目前檢測(cè)為陰性，仍不能完全排除精液排毒的可能性。由于血液樣本的檢測(cè)敏感性通常高于精液，因此存在公豬實(shí)際已感染并在排毒、但精液樣本未能檢出的情況。
建議應(yīng)盡力提高檢測(cè)條件的標(biāo)準(zhǔn)，確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。要明確的是，陰性檢測(cè)結(jié)果并不代表絕對(duì)安全，但一旦檢測(cè)呈陽(yáng)性，則此類精液堅(jiān)決不可使用。降低風(fēng)險(xiǎn)的根本，仍在于提升檢測(cè)精準(zhǔn)性與系統(tǒng)性的生物安全水平。
針對(duì)藍(lán)耳病病原檢測(cè)，采用口腔拭子、扁桃體拭子以及血清樣本的檢測(cè)窗口期分別在什么時(shí)間？血液樣本檢測(cè)為陰性，為什么口腔拭子樣本檢測(cè)為陽(yáng)性？病毒血癥期較短，且用于血毒馴化的血清難以獲得針對(duì)性合格樣本時(shí)，有哪些可行的解決方案？
周磊：關(guān)于藍(lán)耳病病原檢測(cè)的窗口期，首先需要明確的是，窗口期的長(zhǎng)短與感染條件和個(gè)體情況密切相關(guān)。在理想條件下，如對(duì)單頭隔離飼養(yǎng)的豬進(jìn)行精準(zhǔn)攻毒，其在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中可觀察到的病毒血癥期通常為28天至35天。這一期限會(huì)受到豬只日齡、體重及病毒毒株體內(nèi)復(fù)制能力等因素的影響，但一般不會(huì)超過(guò)42天，極少有更長(zhǎng)的案例。然而，組織帶毒的時(shí)間則遠(yuǎn)長(zhǎng)于病毒血癥期。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，病毒在組織中的持續(xù)存在時(shí)間最長(zhǎng)可達(dá)170天至180天左右，盡管在實(shí)際操作中我們很少觀察到如此長(zhǎng)的帶毒期。
就不同樣本的檢測(cè)特點(diǎn)而言，口腔液、血液及組織樣本之間存在顯著差異。根據(jù)國(guó)外針對(duì)公豬進(jìn)行的系統(tǒng)監(jiān)測(cè)研究，口腔液（唾液）的陽(yáng)性檢出時(shí)間通常早于血液，但其病毒載量較低且排毒具有間歇性，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定。相比之下，病毒血癥出現(xiàn)后，血液中的病毒載量通常較高且持續(xù)穩(wěn)定，直至病毒血癥結(jié)束，因此血液樣本是檢測(cè)病毒血癥期感染最可靠的樣本。
若論及組織帶毒檢測(cè)，扁桃體拭子（或稱咽拭子）的敏感性顯著高于其他方法。理想的采樣方式應(yīng)使用帶刷頭的拭子刮取扁桃體表面，從而獲取附著有病毒的組織細(xì)胞，而不僅是口腔分泌物。廣西五祥團(tuán)隊(duì)曾進(jìn)行過(guò)細(xì)致的研究顯示：在已完成馴化的后備群中，血液檢測(cè)僅檢出2頭左右陽(yáng)性，而同群200多頭豬的扁桃體擦拭樣本卻檢出16-19頭陽(yáng)性，其敏感性接近血液檢測(cè)的10倍。因此，扁桃體拭子能夠更敏感地反映組織帶毒狀態(tài)，適用于評(píng)估豬群潛在排毒風(fēng)險(xiǎn)。
在實(shí)際生產(chǎn)中，無(wú)法通過(guò)剖殺評(píng)估組織帶毒，因此扁桃體擦拭樣本成為評(píng)估群體帶毒狀態(tài)和排毒風(fēng)險(xiǎn)的重要替代方案。一旦扁桃體樣本檢測(cè)轉(zhuǎn)為陰性，雖不能完全排除極個(gè)別豬仍帶毒的可能，但可以認(rèn)為群體水平排毒風(fēng)險(xiǎn)已顯著降低。
