PRRSV引起豬只產(chǎn)生哪些病變？
1、藍耳病的六大癥狀：①母豬繁殖障礙：弱仔、流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、木乃伊（圖1）；②母豬不發(fā)情、發(fā)情混亂、不孕不育；③保育豬毛松毛長、高度沉郁；④嚴重的呼吸道癥狀、喘氣、腹瀉；⑤母豬和各階段豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀、共濟失調(diào)；⑥常與副豬嗜血、喘氣病等混合感染，高致病性藍耳病導(dǎo)致母豬和大豬死亡。
圖1 患病母豬流產(chǎn)
2、病理變化：患病仔豬出現(xiàn)典型的PRRS病變，肺臟出血嚴重，水腫、實變（圖2-A,B）。腎臟皮質(zhì)部和髓質(zhì)部出血嚴重（圖2-C）。扁桃體出血，紅腫（圖2-D）。脾臟輕度腫大、邊緣呈鋸齒突起，有出血點，個別有小的梗死灶。肝臟邊緣呈暗紅色，出血嚴重。其他病變包括小腸出現(xiàn)卡他性炎癥、出血，腦輕度充血，全身性的淋巴結(jié)腫大、出血（和顏良，2011）。
圖2 患藍耳病豬只解剖病理變化
CSFV引起豬只產(chǎn)生哪些病變？
1、CSFV可引起豬的高熱稽留、全身廣泛性出血（圖3）及母豬繁殖障礙等一系列癥狀（Moenning, 2000）。其特征是：急性呈敗血性變化，實質(zhì)器官出血，壞死和梗死；慢性呈纖維素性壞死性腸炎，后期常有副傷寒及巴氏桿菌病繼發(fā)。
圖3 患病豬只全身廣泛性出血
2、病理變化：受CSFV感染仔豬的各臟器均出現(xiàn)了不同程度的病變。肺部以不同程度的出血、實變、水腫為主（圖4-A、B）。腎臟包膜下有暗紫紅色小點狀出血，腎皮質(zhì)和髓質(zhì)均有出血（圖4-C）；扁桃體出血，壞死，部分地方出現(xiàn)潰爛（圖4-D）。淋巴結(jié)腫脹，外觀呈深紅色，被膜暗紅的并有出血點；脾臟邊緣出現(xiàn)壞死性病灶（和顏良，2011）。
圖4 患豬瘟豬只解剖病理變化
然而，有研究表明，PRRSV感染后能夠抑制機體對其他病原的免疫反應(yīng)。PRRSV感染可明顯抑制豬瘟疫苗的免疫應(yīng)答(Li and Yang, 2003; Suradhat et al., 2006)。更有研究發(fā)現(xiàn)，如果在豬瘟疫苗免疫前一周給豬接種PRRSV，會顯著抑制CSF抗體的產(chǎn)生（Suradhat et al., 2006）。因此，研制出一種安全、有效且對其它病原沒有干擾的PRRSV疫苗尤為重要。
基于此，中國農(nóng)業(yè)科學院武華博士課題組進行了PRRSV TJM-F92毒株對豬瘟病毒（CSFV）C株是否存在免疫干擾作用的研究。
為什么選擇TJM-F92毒株？
武華博士課題組自2006年至2010年從我國北方部分省市采集疑似高熱病的病死豬病料，在Marc-145細胞上進行病毒分離，共分離到6株病毒，經(jīng)鑒定均為美洲型PRRSV，與JXA1和HUN4等HP-PRRSV株全長及各片段長度完全一致，且在NSP區(qū)段第481位及533～561位均出現(xiàn)不連續(xù)30個氨基酸的缺失。通過對傳代致弱過程中不同代次的病毒進行全基因序列分析，結(jié)果顯示，我們將PRRSV TJ株在Marc-145上連續(xù)傳代弱化，每隔5～10代進行蝕斑克隆純化至F19時，篩選到一株在NSP基因上除存在不連續(xù)30個氨基酸缺失的同時還存在一段連續(xù)缺失120個氨基酸的毒株（圖5）。在進行PRRSV活疫苗研制過程中，通過蝕斑克隆純化篩選獲得的一株致弱毒株并傳代后，即PRRSV TJM-F92株。該毒株與同期研制的其它HP-PRRSV活疫苗相比，具有病毒血癥持續(xù)時間短，病毒血癥載毒量低，散毒能力差，同居不易感染，無毒力返強趨勢，安全性優(yōu)良，同時具有優(yōu)良的保護效力等特點。
圖5 TJM-F92相較HP毒株有360個核苷酸自然缺失
TJM-F92毒株是否存在免疫抑制？
在進行PRRSV TJM-F92株活疫苗研制過程中，課題組進行了PRRSV TJM-F92株對CSFV C株免疫干擾研究的預(yù)試驗，結(jié)果初步表明，PRRSV TJM-F92株與CSFV C株同時免疫，前者對后者無免疫抑制作用。
隨后又開展了單劑量PRRSV TJM-F92株對單劑量CSFV C株的免疫干擾研究，分別從體液免疫、細胞免疫、免疫攻毒、病理變化等方面進行了詳細研究。結(jié)果表明，PRRSV TJM-F92株與CSFV C株二聯(lián)免疫組仔豬在抗體水平、白細胞數(shù)量變化以及T細胞亞群含量等方面與兩個單苗免疫組無明顯差異，說明免疫期間，PRRSV TJM-F92株沒有影響CSFV C株的免疫應(yīng)答。免疫28天后攻擊PRRSV TJ株強毒結(jié)果表明，二聯(lián)免疫組與PRRSV TJMF92株單獨免疫組仔豬，均未出現(xiàn)PRRS典型臨床癥狀，兩組免疫組在抗體水平、白細胞數(shù)量、T細胞亞群比例等方面均無明顯差異。PRRSV陰性對照組仔豬的白細胞數(shù)量與免疫組仔豬白細胞數(shù)量相比明顯下降，差異顯著。
攻毒后免疫組仔豬完全保護，PRRSV陰性對照組仔豬死亡率達80%。攻擊CSFV石門系血毒結(jié)果表明，二聯(lián)免疫組與CSFV C株單獨免疫組仔豬，均未出現(xiàn)CSF典型的臨床癥狀，兩組試驗動物在抗體水平、白細胞數(shù)量、T細胞亞群比例變化方面無明顯差異。CSFV陰性對照動物均出現(xiàn)了CSF典型的臨床癥狀，死亡率高達100%，陰性對照組仔豬CD3+和CD4+T細胞亞群的數(shù)量在感染過程中均出現(xiàn)了明顯的降低。該研究結(jié)果表明，同時免疫PRRSV TJM-F92株疫苗株與CSFV C株疫苗株，PRRSV TJM-F92株不會抑制機體對CSFV C株的免疫應(yīng)答，試驗同時表明，CSFV C株也不干擾PRRSV TJM-F92株疫苗的免疫效果（和彥良，2011）。
本研究還設(shè)計應(yīng)用高劑量PRRSV TJM-F92株（106.0TCID50）對低劑量CSFV C株（101.0FAID50）的免疫干擾研究，其中PRRSV TJM-F92株使用的劑量為10倍使用劑量（106.0TCID50），CSFV C株使用劑量僅為101.0FAID50，相當于CSFV C株最小免疫劑量，并同時設(shè)計CSFV C株低劑量免疫對照組和CSFV C株陰性對照組，分別從體液免疫、免疫攻毒保護及病理學變化等方面進一步評價PRRSV TJM-F92株對CSFVC株是否存在免疫干擾作用。試驗結(jié)果表明，高劑量PRRSV TJM-F92株與低劑量CSFV C株免疫組在體液免疫、攻毒保護與病理學變化等方面與低劑量CSFV C株免疫組均無顯著差異。
總而言之，應(yīng)用傳統(tǒng)方法制備的PRRSV活疫苗，很難改變PRRSV的免疫抑制性。臨床上通過將PRRSV活疫苗與其它活疫苗進行間隔免疫來降低PRRSV活苗對其它活疫苗的免疫干擾。然而，值得一提的是，武華博士課題組經(jīng)過大量試驗證明，PRRSV TJM-F92株是一株安全有效的疫苗株，與CSFV C株活疫苗同時免疫，對CSFV C株無免疫干擾作用。
