母豬群的感染狀態(tài)決定了選擇藍耳病防控方法的有效性,不穩(wěn)定的母豬群會讓小豬帶毒,并不斷在生長豬群中循環(huán)。豬藍耳病的防控首先應了解本場母豬的感染狀態(tài)、感染了哪些毒株,做好綜合防控措施,才能有的放矢。隨著時間的推移豬場感染狀態(tài)也會發(fā)生變化,評估母豬群的穩(wěn)定狀態(tài)不是憑借眼觀的臨床表現(xiàn)判定,而是要通過嚴謹?shù)谋O(jiān)測評估。
一、美國的評估方法
美國豬獸醫(yī)協(xié)會(AASV)和美國農(nóng)業(yè)部PRRS-Cap委員會制定了豬場中所處藍耳病病毒(PRRSV)的四個感染狀態(tài),即根據(jù)PRRSV在豬群中Shedding(排毒)和Exposure(暴露)的情況可將藍耳病在豬場中所處的狀態(tài)分為:陽性不穩(wěn)定場、陽性穩(wěn)定場、暫定陰性場、陰性場。該標準由已故明尼蘇達大學最著名的豬病教授 Bob Morrison,堪薩斯州立大學Raymond(Bob) Rowland及愛荷華州立大學教授、第十版豬病學主編Jeff Zimmerman等多位著名的PRRSV專家審議通過(見下表)。

美國的豬藍耳病感染狀態(tài)的判斷通過兩個核心指標即豬只的排毒狀況和暴露情況,排毒狀態(tài)一般通過PCR檢測,暴露即豬只是否暴露于病毒之中,主要是檢測抗體情況,一般用ELISA評估。
1、陽性不穩(wěn)定:臨床有PRRS相關問題并在組織病料中PCR檢出PRRSV。
2、陽性穩(wěn)定:斷奶日齡的仔豬持續(xù)90 d沒有病毒血癥和種豬群無PRRS臨床表現(xiàn)。一般每個月采集斷奶日齡的仔豬血液30份,PCR檢測PRRSV陰性且種豬群無PRRS相關的臨床癥狀,即判定為陽性穩(wěn)定場。
3、暫定陰性:引進的陰性后備母豬60d后,ELISA檢測抗體仍陰性,生長豬ELISA抗體也為陰性。
4、陰性:分為3類:1)以前感染豬被更新后,種豬群沒有發(fā)現(xiàn)ELISA陽性豬;2)成為暫定陰性豬場已經(jīng)一年,種豬群ELISA檢測無陽性;3)重新用陰性豬建群后,至少30天以上種豬群ELISA檢測無陽性。
二、我國感染狀態(tài)的分類
結(jié)合繁殖成績、血清學情況、斷奶仔豬的帶毒情況將母豬群感染狀態(tài)分為暴發(fā)場、不穩(wěn)定場、陽性大體穩(wěn)定場、陽性穩(wěn)定/病毒循環(huán)場、陽性穩(wěn)定/無病毒循環(huán)場、陰性場六類,判定標準如下:
1、暴發(fā)場:各生產(chǎn)階段出現(xiàn)PRRS臨床問題;抗原在各階段都能檢測到;生產(chǎn)成績明顯差。2、不穩(wěn)定場:多見種豬和哺乳仔豬臨床表現(xiàn)、繁殖損失、生產(chǎn)成績波動大,抗原檢測陽性。
3、大體穩(wěn)定場:PSY達到基準線水平;仔豬處理時采樣60個,5合1,PCR檢測,連續(xù)8周以上陰性;斷奶日齡豬采30個,5合1,PCR檢測,連續(xù)4周以上陰性。
4、陽性穩(wěn)定/病毒循環(huán)場:斷奶日齡仔豬每月(或更高頻率)采30個,5合1,PCR檢測,連續(xù)90天以上陰性;保育豬或育肥豬ELISA檢測,有PRRSV活躍跡象,抗原檢測陽性。
5、陽性穩(wěn)定/無病毒循環(huán)場:斷奶日齡仔豬每月(或更高頻率)采30個,5合1,PCR檢測,連續(xù)90天以上陰性;保育豬或育肥豬ELISA檢測,無PRRSV活躍跡象,抗原檢測陰性。
6、陰性場:引進的陰性后備60 d后無感染跡象(ELISA檢測);保育豬或育肥豬ELISA檢測,無PRRSV活躍跡象。
六類不同感染狀態(tài)的母豬場,選擇的防控措施差異大,其中不穩(wěn)定場、大體穩(wěn)定場和陽性穩(wěn)定場在我國的占有比例高。母豬群的穩(wěn)定性評估(無排毒),即通過每月隨機采斷奶豬血樣30個,5合1,RT-PCR檢測,連續(xù)3個月陰性,可判斷為穩(wěn)定群。母豬群的暴露狀態(tài)評估,即通過ELISA檢測引進陰性后備豬后60 d以上無轉(zhuǎn)陽。
三、感染毒株認定
全球流行的藍耳病病毒分為兩個亞型,即歐洲型(I型)和美洲型(II型),我國流行的PRRSV毒株主要是美洲型(II型)毒株,全球PRRSV的分類是基于ORF5研究,我國豬群的PRRSV分屬于1、3、5、8譜系,并以其中的譜系8為主流。
2017年度張桂紅教授課題組通過對華南地區(qū)陽性病料進行病毒分離鑒定,結(jié)果表明HP-PRRSV占54.19%(95%CI:47.5~60.8%),以GM2為代表的第三分支亞群的毒株占35.68%(95%CI:27.6~44.3%),類NADC30株占9.25%(95%CI:5.8~13.8%)。上述結(jié)果提示,我國華南地區(qū)藍耳病毒流行毒株仍以高致病性毒株為主。楊漢春團隊對我國流行的藍耳病毒毒株進行比對分析,發(fā)現(xiàn)譜系8占81.95%(268/327)。
對于PRRS暴發(fā)場、不穩(wěn)定場、病毒循環(huán)場,一般采5個左右樣本,對ORF5、Nsp2高變區(qū)測序比對,綜合分析感染何種譜系毒株,是單個還是多個譜系毒株,以及與典型毒株的同源性。豬場藍耳病感染毒株可能隨著時間推移而發(fā)生變化,所以需要持續(xù)性跟蹤(半年測1次),分析是否發(fā)生變化或多個毒株感染。一般同一譜系內(nèi)的保護效果較好,不同譜系之間交差保護弱。
下面舉兩個例子說明豬場的感染狀態(tài)會發(fā)生變化!
示例1:
圖1(NP) 豬藍耳病抗體陽性率
圖2(NP) 豬藍耳病抗體S/P平均值及離散度
小結(jié):該場未免疫藍耳苗,采樣時母豬群、保育豬處于藍耳暴發(fā)狀態(tài),母豬、后備豬群藍耳抗體水平處于活躍狀態(tài),2~6周齡仔豬血清相極不穩(wěn)定。
示例2:
圖3(2016/1/8) 豬藍耳病抗體陽性率
圖4(2017/6/7) 豬藍耳病抗體陽性率
小結(jié):通過圖3、圖4兩個不同時間段檢測結(jié)果顯示,該場的商品豬群感染時間點由6周齡推遲到了10周齡左右,說明了豬群的感染狀態(tài)會隨時間的推移而發(fā)生改變。
示例3:
圖5 依據(jù)ORF5基因推導編碼的氨基酸序列的同源性
小結(jié):該場的兩次取樣時間分別是2014/11和2016/1,基于兩次測序結(jié)果和參考株的ORF5基因推導編碼的氨基酸序列的遺傳演化分析發(fā)現(xiàn),該場的流行毒株發(fā)生改變。
四、小結(jié)
評估和追蹤豬群藍耳病毒的感染狀態(tài)是防控藍耳病的基礎,防控豬場藍耳病也不是一成不變的,要根據(jù)本場的感染狀態(tài)、感染毒株變化而做出相應的調(diào)整。碩騰團隊總結(jié)的母豬群六類評估方法具有實際的可操作性,為今后豬場藍耳病的綜合防控提供理論依據(jù)。
